การเตรียมตัวอย่างและกำลังโหลด
เนื่องจากในกรณีส่วนใหญ่ การใช้ระบบบัฟเฟอร์ต่อเนื่องโดยไม่มีการเรียงซ้อนของเจล ตัวอย่างจึงควรมีความเข้มข้นที่เหมาะสมและมีปริมาตรน้อย ใช้ปิเปตให้ค่อยๆ เติมตัวอย่างด้วยปริมาณ 5-10 ไมโครกรัมต่อหลุม เพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้ความละเอียดลดลงอย่างมาก เมื่อไรกำลังโหลดตัวอย่างจะต้องปิดแหล่งจ่ายไฟ ตัวอย่างควรมีสีย้อมบ่งชี้ (โบรโมฟีนอลสีน้ำเงินหรือสีส้ม 0.025%) และซูโครส (10-15%) หรือกลีเซอรอล (5-10%) เพื่อเพิ่มความหนาแน่น ทำให้ตัวอย่างเข้มข้น และป้องกันการแพร่กระจาย อย่างไรก็ตาม บางครั้งซูโครสหรือกลีเซอรอลอาจทำให้เกิดแถบรูปตัวยูในผลการตรวจอิเล็กโทรโฟรีซิส ซึ่งสามารถหลีกเลี่ยงได้โดยใช้ Ficoll 2.5% (โพลีไวนิลไพโรลิโดน)
อิเล็กโทรโฟเรซิส
แรงดันไฟฟ้าสำหรับอิเล็กโทรโฟรีซิสคือ 5-15 V/cm โดยทั่วไปจะอยู่ที่ประมาณ 10 V/cm สำหรับการแยกโมเลกุลขนาดใหญ่ แรงดันไฟฟ้าควรต่ำกว่าปกติไม่เกิน 5 V/cm
การย้อมสี
สีย้อมฟลูออเรสเซนต์เอทิเดียมโบรไมด์ (EB) มักใช้สำหรับการย้อมสีเพื่อสังเกตแถบ DNA ในเจลอะกาโรส EB สามารถแทรกระหว่างคู่เบสของโมเลกุล DNA ทำให้ EB จับกับ DNA การดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลต 260 นาโนเมตรโดย DNA จะถูกถ่ายโอนไปยัง EB และ EB ที่ถูกผูกไว้จะปล่อยแสงเรืองแสงที่ 590 นาโนเมตรในบริเวณสีส้มแดงของสเปกตรัมแสงที่มองเห็นได้ การย้อมสีเจลในสารละลาย MgSO4 1 มิลลิโมล/ลิตร เป็นเวลา 1 ชั่วโมงสามารถลดการเรืองแสงพื้นหลังที่เกิดจาก EB ที่ไม่ได้ผูกไว้ ซึ่งอำนวยความสะดวกในการตรวจจับ DNA จำนวนเล็กน้อย
สีย้อม EB มีข้อดีหลายประการ: ใช้งานง่าย ไม่ทำลายกรดนิวคลีอิก มีความไวสูง และสามารถเปื้อนได้ทั้ง DNA และ RNA สามารถเพิ่ม EB ลงในตัวอย่างและติดตามโดยใช้การดูดซับรังสียูวีได้ตลอดเวลา หลังจากการย้อมสี EB สามารถกำจัดออกได้โดยการสกัดด้วยเอ็น-บิวทานอล
อย่างไรก็ตาม สีย้อม EB เป็นสารก่อกลายพันธุ์ที่มีศักยภาพ และควรใช้ความระมัดระวัง เช่น การสวมถุงมือโพลีเอทิลีน ในระหว่างการจัดการ ส้มอะคริดีนยังเป็นสีย้อมที่ใช้กันทั่วไป เนื่องจากสามารถแยกความแตกต่างระหว่างกรดนิวคลีอิกสายเดี่ยวและสายคู่ (DNA, RNA) โดยแสดงเรืองแสงสีเขียว (530 นาโนเมตร) สำหรับกรดนิวคลีอิกเกลียวคู่ และเรืองแสงสีแดง (640 นาโนเมตร) สำหรับกรดนิวคลีอิกเกลียวเดี่ยว นอกจากนี้ สีย้อมอื่นๆ เช่น เมทิลีนบลู, เมทิลีนกรีน และควิโนลีนบี สามารถใช้ในการย้อมสีได้
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) มีความเชี่ยวชาญในการผลิตเครื่องมืออิเล็กโทรโฟรีซิสมานานกว่า 50 ปีด้วยทีมงานด้านเทคนิคมืออาชีพและศูนย์ R&D ของเราเอง เรามีสายการผลิตที่เชื่อถือได้และครบวงจรตั้งแต่การออกแบบไปจนถึงการตรวจสอบ และคลังสินค้า ตลอดจนการสนับสนุนด้านการตลาด ผลิตภัณฑ์หลักของเรา ได้แก่ Electrophoresis Cell (ถัง/ห้อง), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System ฯลฯ
ขณะนี้เรากำลังมองหาพันธมิตร ยินดีต้อนรับทั้งถังอิเล็กโทรโฟเรซิส OEM และผู้จัดจำหน่าย
หากคุณมีแผนการซื้อผลิตภัณฑ์ของเรา โปรดอย่าลังเลที่จะติดต่อเรา คุณสามารถส่งข้อความถึงเราทางอีเมล[ป้องกันอีเมล]หรือ[ป้องกันอีเมล]หรือกรุณาโทรหาเราที่ +86 15810650221 หรือเพิ่ม Whatsapp +86 15810650221 หรือ Wechat: 15810650221
กรุณาสแกนรหัส QR เพื่อเพิ่มใน Whatsapp หรือ WeChat
เวลาโพสต์: Dec-20-2023