เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสเป็นหนึ่งในวิธีการหลักที่ใช้ในอณูชีววิทยาสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการย้ายชิ้นส่วนของ DNA ผ่านเจล โดยแยกออกจากกันตามขนาดหรือรูปร่าง อย่างไรก็ตาม คุณเคยพบข้อผิดพลาดใดๆ ในระหว่างการทดลองอิเล็กโตรโฟเรซิส เช่น มีแถบเปื้อนบนเจล agarose หรือไม่มีแถบบนเจลหรือไม่ อะไรคือสาเหตุของข้อผิดพลาดเหล่านี้?
ช่างเทคนิคของเราได้สรุปการแก้ไขปัญหาบางส่วนไว้ที่นี่เพื่อใช้อ้างอิง
1. ทาแถบบนเจลอะกาโรส
DNA ถูกย่อยสลาย หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของนิวเคลียส
● บัฟเฟอร์อิเล็กโตรโฟรีซิสไม่สด หลังจากใช้บัฟเฟอร์อิเล็กโตรโฟเรซิสซ้ำแล้วซ้ำเล่า ความแรงของไอออนิกจะลดลง และค่า pH ของมันจะเพิ่มขึ้น ดังนั้นความจุของบัฟเฟอร์จึงอ่อนตัวลง ซึ่งส่งผลต่อเอฟเฟกต์อิเล็กโทรโฟรีซิส ขอแนะนำให้เปลี่ยนบัฟเฟอร์อิเล็กโตรโฟเรซิสบ่อยๆ
● ใช้สภาวะอิเล็กโตรโฟรีซิสที่ไม่เหมาะสม อย่าให้แรงดันไฟฟ้าเกิน 20 V/cm และรักษาอุณหภูมิ <30° C ในระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิส สำหรับอิเล็กโตรโฟรีซิสสาย DNA ขนาดยักษ์ อุณหภูมิควรอยู่ที่ <15° C ตรวจสอบว่าบัฟเฟอร์อิเล็กโทรโฟรีซิสมีความจุบัฟเฟอร์เพียงพอ
● โหลด DNA บนเจลมากเกินไป ลดปริมาณดีเอ็นเอ
● มีเกลือใน DNA มากเกินไป ใช้การตกตะกอนของเอทานอลเพื่อขจัดเกลือส่วนเกินในขั้นสูง
● DNA ถูกปนเปื้อนด้วยโปรตีน ใช้การสกัดฟีนอลเพื่อขจัดโปรตีนขั้นสูง
● DNA ถูกทำลาย อย่าให้ความร้อนก่อนอิเล็กโทรโฟเรซิส เจือจาง DNA ในบัฟเฟอร์ด้วย NaCl 20 มิลลิโมลาร์
2. ความผิดปกติในการโยกย้ายของแถบ DNA
● การเปลี่ยนลักษณะของไซต์ COS ของแฟรกเมนต์ λHind III ให้ความร้อน DNA เป็นเวลา 5 นาทีภายใต้อุณหภูมิ 65° C ก่อนอิเล็กโตรโฟรีซิส จากนั้นทำให้เย็นบนหน่วยน้ำแข็งเป็นเวลา 5 นาที
● ใช้สภาวะอิเล็กโตรโฟรีซิสที่ไม่เหมาะสม อย่าให้แรงดันไฟฟ้าเกิน 20 V/cm และรักษาอุณหภูมิ <30° C ในระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิส ตรวจสอบว่าบัฟเฟอร์อิเล็กโทรโฟเรซิสมีความจุบัฟเฟอร์เพียงพอ
● DNA ถูกทำลาย อย่าให้ความร้อนก่อนอิเล็กโทรโฟเรซิส เจือจาง DNA ในบัฟเฟอร์ด้วย NaCl 20 มิลลิโมลาร์
3. มีแถบ DNA จางๆ หรือไม่มีเลยบนเจลอะกาโรส
● มีปริมาณหรือความเข้มข้นของ DNA ที่บรรจุอยู่บนเจลไม่เพียงพอ เพิ่มปริมาณดีเอ็นเอ อิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจลโพลีอะคริลาไมด์มีความไวมากกว่าอะกาโรสอิเล็กโทรโฟรีซิสเล็กน้อย และสามารถลดการโหลดตัวอย่างได้อย่างเหมาะสม
● DNA ถูกย่อยสลาย หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของนิวเคลียส
● DNA ถูกอิเล็กโตรโฟเรสออกจากเจล อิเล็กโตรโฟรีสเจลโดยใช้เวลาน้อยลง ใช้แรงดันไฟฟ้าต่ำ หรือใช้เจลเปอร์เซ็นต์ที่สูงกว่า
● มีการใช้แหล่งกำเนิดแสง W ที่ไม่เหมาะสมในการแสดง DNA ที่เปื้อนเอทิเดียมโบรไมด์ ใช้แสง W ที่มีความยาวคลื่นสั้น (254 นาโนเมตร) เพื่อความไวที่มากขึ้น
4. แถบ DNA หายไป
DNA ขนาดเล็กถูกอิเล็กโตรโฟเรสออกจากเจล อิเล็กโตรโฟรีสเจลโดยใช้เวลาน้อยลง ใช้แรงดันไฟฟ้าต่ำ หรือใช้เจลเปอร์เซ็นต์ที่สูงกว่า
● ยากต่อการแยกแยะแถบ DNA ของโมเลกุลที่คล้ายกัน เพิ่มเวลาอิเล็กโทรโฟเรซิส และตรวจสอบความเข้มข้นของเจลเพื่อให้แน่ใจว่าจะใช้เปอร์เซ็นต์เจลได้อย่างถูกต้อง
● DNA ถูกทำลาย อย่าให้ความร้อนก่อนอิเล็กโทรโฟเรซิส เจือจาง DNA ในบัฟเฟอร์ด้วย NaCl 20 มิลลิโมลาร์
● สาย DNA มีขนาดใหญ่ และเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแบบธรรมดาไม่เหมาะ วิเคราะห์พัลส์เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสคุณมีปัญหาอื่นใดอีกเกี่ยวกับ agarose gel electrophoresis? เราจะค้นคว้าเพิ่มเติมเพื่อเป็นแนวทางในอนาคต
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) เป็นบริษัทเฉพาะทางที่มุ่งเน้นผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้องกับอิเล็กโตรโฟเรซิสในประเทศจีน เรื่องราวเริ่มต้นในปี 1970 เมื่อจีนยังไม่เข้าสู่การปฏิรูปและกำหนดเวลาเปิดทำการ ตลอดหลายปีที่ผ่านมา Liuyi Bitotech มีแบรนด์ของตัวเอง ซึ่งเป็นที่รู้จักในชื่อ Liuyi Brand ในตลาดภายในประเทศสำหรับผลิตภัณฑ์อิเล็กโตรโฟรีซิส
แบรนด์ Liuyi มีประวัติยาวนานกว่า 50 ปีในประเทศจีน และบริษัทสามารถจัดหาผลิตภัณฑ์ที่มีเสถียรภาพและมีคุณภาพสูงทั่วโลก ผ่านการพัฒนามาหลายปี มันคุ้มค่ากับการเลือกของคุณ!
เซลล์อิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอน (ถัง/ห้อง) ของ Liuyi Biotech มีคุณภาพสูงและมีลักษณะที่ดี ด้วยถาดเจลที่มีขนาดแตกต่างกัน จึงสามารถตอบสนองความต้องการในการทดลองที่แตกต่างกันของคุณได้ เรามีทีมงานด้านเทคนิคและโรงงานของเราเอง ตั้งแต่การออกแบบไปจนถึงการผลิต วัตถุดิบไปจนถึงชิ้นส่วนสำคัญ เราสามารถควบคุมกระบวนการทั้งหมดได้ ซีรีส์ DYCP 31 มีไว้สำหรับ DNA อิเล็กโตรโฟเรซิส ซึ่งเป็นโมเดลดีซีพี-31BN, ดีซีพี-31CN,DYCP-31DN, และดีซีพี-31อี- ความแตกต่างคือขนาดเจลและราคา เราจัดหาผลิตภัณฑ์เต็มขนาดสำหรับลูกค้าของเรา โมเดลดีซีพี-32ซีสามารถทำเจลที่ใหญ่ที่สุดได้ 250 มม. * 250 มม.
ในขณะเดียวกัน เราขอแนะนำแหล่งจ่ายไฟแบบอิเล็กโตรโฟเรซิสของเราDYY-6C-DYY-6DและDYY-10Cสำหรับเซลล์อิเล็กโทรโฟเรซิสของเรา (ถัง/ห้อง) ซีรีส์ DYCP-31 และ 32
หากคุณต้องการข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์ โปรดเยี่ยมชมเว็บไซต์นี้เพื่อรับข้อมูลเพิ่มเติม และยินดีที่จะติดต่อเราผ่านทางอีเมลเพื่อแจ้งให้เราทราบว่าคุณต้องการอะไร และดูว่าเราสามารถจัดหาวิธีแก้ปัญหาให้กับคุณได้หรือไม่
สำหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับเรา โปรดติดต่อเราทางอีเมล[ป้องกันอีเมล], [ป้องกันอีเมล].
เวลาโพสต์: May-09-2022