การปรับเจลอิเล็กโทรโฟเรซิสให้เหมาะสม: วิธีปฏิบัติที่ดีที่สุดสำหรับปริมาตรตัวอย่าง แรงดันไฟฟ้า และเวลา

การแนะนำ

เจลอิเล็กโตรโฟเรซิสเป็นเทคนิคพื้นฐานในอณูชีววิทยา ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการแยกโปรตีน กรดนิวคลีอิก และโมเลกุลขนาดใหญ่อื่นๆ การควบคุมปริมาตรตัวอย่าง แรงดันไฟฟ้า และเวลาอิเล็กโทรโฟเรซิสอย่างเหมาะสมเป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งในการบรรลุผลลัพธ์ที่แม่นยำและทำซ้ำได้ข้อเสนอจากเพื่อนร่วมงานในห้องปฏิบัติการของเราแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดในการจัดการพารามิเตอร์เหล่านี้ระหว่างเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส SDS-PAGE

ผลิตภัณฑ์เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสเทคโนโลยีชีวภาพปักกิ่งหลิวอี้

ปริมาณตัวอย่าง: รับประกันความสม่ำเสมอ

เมื่อดำเนินการอิเล็กโทรโฟเรซิส SDS-PAGE ปริมาตรตัวอย่างเป็นปัจจัยสำคัญที่อาจส่งผลกระทบอย่างมากต่อความละเอียดของผลลัพธ์ของคุณ โดยทั่วไปแนะนำให้บรรจุโปรตีนทั้งหมด 10 ไมโครลิตรต่อหลุม เพื่อให้มั่นใจถึงความสม่ำเสมอและป้องกันการแพร่กระจายของตัวอย่างระหว่างหลุมที่อยู่ติดกัน สิ่งสำคัญคือต้องบรรจุบัฟเฟอร์การโหลด 1x ในหลุมว่างใดๆ ในปริมาณเท่ากัน ข้อควรระวังนี้ช่วยป้องกันการแพร่กระจายของตัวอย่างไปยังเลนข้างเคียง ซึ่งอาจเกิดขึ้นได้หากปล่อยบ่อว่างเปล่า

ก่อนที่จะโหลดตัวอย่างของคุณ ให้เริ่มต้นด้วยการเพิ่มเครื่องหมายน้ำหนักโมเลกุลลงในหลุมเสมอ ช่วยให้ระบุขนาดโปรตีนได้ง่ายหลังอิเล็กโตรโฟรีซิส

การควบคุมแรงดันไฟฟ้า: ปรับสมดุลความเร็วและความละเอียด

แรงดันไฟฟ้าที่ใช้ระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสส่งผลโดยตรงต่อทั้งความเร็วที่ตัวอย่างเคลื่อนที่ผ่านเจลและความละเอียดของการแยก สำหรับ SDS-PAGE ขอแนะนำให้เริ่มต้นด้วยแรงดันไฟฟ้าต่ำประมาณ 80V แรงดันไฟฟ้าต่ำเริ่มต้นนี้ช่วยให้ตัวอย่างสามารถเคลื่อนที่ได้ช้าๆ และสม่ำเสมอ โดยมุ่งความสนใจไปที่แถบแหลมคมขณะเข้าสู่เจลสำหรับแยก

เมื่อตัวอย่างเข้าไปในเจลสำหรับแยกสารจนหมดแล้ว แรงดันไฟฟ้าจะเพิ่มขึ้นเป็น 120V แรงดันไฟฟ้าที่สูงขึ้นนี้จะช่วยเร่งการโยกย้าย ทำให้มั่นใจได้ว่าโปรตีนจะถูกแยกออกจากกันอย่างมีประสิทธิภาพตามน้ำหนักโมเลกุล สิ่งสำคัญคือต้องติดตามความคืบหน้าของด้านหน้าสีย้อมโบรโมฟีนอลบลู ซึ่งบ่งชี้ถึงความสมบูรณ์ของอิเล็กโตรโฟรีซิส สำหรับเจลที่มีความเข้มข้น 10-12% โดยทั่วไปจะใช้เวลา 80-90 นาทีก็เพียงพอแล้ว อย่างไรก็ตาม สำหรับเจล 15% คุณอาจต้องยืดเวลาการทำงานออกไปเล็กน้อย

การบริหารเวลา: รู้ว่าเมื่อใดควรหยุด

ระยะเวลาเป็นอีกปัจจัยสำคัญในการทำเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส การใช้เจลเป็นเวลานานหรือสั้นเกินไปอาจนำไปสู่การแยกตัวที่ไม่เหมาะสม การเคลื่อนตัวของสีย้อมโบรโมฟีนอลบลูเป็นตัวบ่งชี้ที่มีประโยชน์: เมื่อถึงก้นเจล โดยปกติก็ถึงเวลาที่ต้องหยุดการวิ่ง สำหรับเจลมาตรฐาน เช่น 10-12% โดยปกติแล้วระยะเวลาอิเล็กโทรโฟรีซิสประมาณ 80-90 นาทีก็เพียงพอแล้ว สำหรับเปอร์เซ็นต์เจลที่สูงกว่า เช่น 15% ควรขยายเวลาการทำงานเพื่อให้แน่ใจว่าโปรตีนจะแยกตัวได้อย่างสมบูรณ์

การจัดการบัฟเฟอร์: การใช้ซ้ำและการเตรียมบัฟเฟอร์

บัฟเฟอร์อิเล็กโทรโฟรีซิสสามารถนำมาใช้ซ้ำได้ 1-2 ครั้ง ขึ้นอยู่กับเงื่อนไขเฉพาะของห้องปฏิบัติการของคุณ อย่างไรก็ตาม เพื่อผลลัพธ์ที่ดีที่สุด แนะนำให้เตรียมบัฟเฟอร์ 10 เท่าใหม่และเจือจางก่อนใช้งาน เพื่อให้แน่ใจว่าบัฟเฟอร์จะคงประสิทธิภาพไว้ ส่งผลให้ผลลัพธ์อิเล็กโตรโฟเรซิสมีความน่าเชื่อถือมากขึ้น

ผลิตภัณฑ์เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสเทคโนโลยีชีวภาพปักกิ่งหลิวอี้

ด้วยการควบคุมปริมาตรตัวอย่าง แรงดันไฟฟ้า และเวลาอิเล็กโทรโฟเรซิสอย่างระมัดระวัง คุณสามารถปรับปรุงความแม่นยำและความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสของคุณได้อย่างมาก การนำแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดเหล่านี้ไปใช้ในงานห้องปฏิบัติการของคุณจะช่วยให้คุณได้รับแถบที่ชัดเจนและชัดเจนยิ่งขึ้น ซึ่งนำไปสู่ข้อมูลที่ดีขึ้นสำหรับการวิเคราะห์ขั้นปลาย

หากคุณมีวิธีการที่ดีในการเพิ่มประสิทธิภาพการทดลองเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส โปรดปรึกษาเรา!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) มีความเชี่ยวชาญในการผลิตเครื่องมืออิเล็กโทรโฟรีซิสมานานกว่า 50 ปีด้วยทีมงานด้านเทคนิคมืออาชีพและศูนย์ R&D ของเราเอง เรามีสายการผลิตที่เชื่อถือได้และครบวงจรตั้งแต่การออกแบบไปจนถึงการตรวจสอบ และคลังสินค้า ตลอดจนการสนับสนุนด้านการตลาด ผลิตภัณฑ์หลักของเรา ได้แก่ เซลล์อิเล็กโตรโฟเรซิส (ถัง/ห้อง), พาวเวอร์ซัพพลายอิเล็กโทรโฟเรซิส, ทรานส์อิลลูมิเนเตอร์ LED สีฟ้า, ทรานส์อิลลูมิเนเตอร์ UV, เจลอิมเมจ & วิเคราะห์ระบบ ฯลฯ นอกจากนี้เรายังจัดหาเครื่องมือในห้องปฏิบัติการ เช่น เครื่องมือ PCR, เครื่องผสม vortex และเครื่องหมุนเหวี่ยงสำหรับห้องปฏิบัติการ

หากคุณมีแผนการซื้อผลิตภัณฑ์ของเรา โปรดอย่าลังเลที่จะติดต่อเรา คุณสามารถส่งข้อความถึงเราทางอีเมล[ป้องกันอีเมล]หรือ[ป้องกันอีเมล]หรือกรุณาโทรหาเราที่ +86 15810650221 หรือเพิ่ม Whatsapp +86 15810650221 หรือ Wechat: 15810650221

กรุณาสแกนรหัส QR เพื่อเพิ่มใน Whatsapp หรือ WeChat